Sisu
- Valgusmikroskoopia ja rakubioloogia
- Töötatud on kümmekond eksperimentaalset protseduuri
- Keemilised plekid ja valguse mikroskoopia
- Suumimise lihtsus
- Fluorestsentsmikroskoopia eelised
- Valgusmikroskoopide puudus
Valgus- või liitmikroskoop on tööriist, millega iga bioloogiaüliõpilane tõenäoliselt kokku puutub. Valgusmikroskoobi eeliste mõistmine annab ülevaate selle kasulikkusest klassiruumis või kliinikus. Paljud eksperimentaalsed tehnikad, mis on täiustatud kasutamiseks valgusmikroskoobiga, selle kasutusmugavus ja suhteliselt taskukohasus võrreldes muud tüüpi mikroskoopidega muudavad selle paljude eluteaduste jaoks eelistatavaks valikuks.
Valgusmikroskoopia ja rakubioloogia
Kuna rakke ei saa palja silmaga vaadata, on mikroskoopia raku struktuuri ja funktsioonide uurimise põhikomponent. Valgusmikroskoobi abil kasutatakse proovi valgustamiseks eredal väljal valgusallikat. Proov värvitakse, et muuta struktuurid, mis on tavaliselt poolläbipaistvad või peaaegu värvitu, taustast tumedamad ja hõlpsamini nähtavad. Teine mikroskoopia tehnika on fluorestsentsmikroskoopia. Tumeda peitsi kasutamise asemel heledal taustal värvitakse rakud fluorestsentsvärvidega ja vaadatakse tumedal taustal.
Töötatud on kümmekond eksperimentaalset protseduuri
Kudede uurimist valgusmikroskoopiaga on praktiseeritud enam kui 50 aastat. Valgusmikroskoopia on mikroskoopia kõige juurdepääsetavam vorm kogu maailmas ja on endiselt üks peamisi koolitusvahendeid patoloogidele või arstidele, kes diagnoosivad haigusi kudede mikroskoopilise struktuuri uurimisel. Tuhanded laborid kogu maailmas on täiustanud kümneid katseprotseduure ja paljud neist on vabalt kättesaadavad. Madala hinnaga ja suure hulga bioloogilise teabe kombinatsioon, mille valgusmikroskoop pakub, muudab selle hindamatuks vahendiks teadusuuringutes ja meditsiinis.
Keemilised plekid ja valguse mikroskoopia
Proovi vaatlemine valguse mikroskoobi all nõuab värviliste keemiliste plekkide abi. Need sinised, punased, rohelised ja pruunid plekid kinnitatakse koele selge kemikaaliga, mida nimetatakse permiidiks, mis õhu käes kokkupuutel kõveneb. Niiviisi kombineerituna püsivad need keemilised plekid ja koed aastaid pleekimata, võimaldades teadlastel sama proovi pikka aega uurida, ilma et värvus kaotaks. Nähtamatuse kaotamine on fluorestsentsmikroskoopia piirang, kuna fluorestsentsvärvid aja jooksul tuhmuvad.
Suumimise lihtsus
Liitmikroskoobi võime hõlpsalt suumida väikese kala saba vaatlemisel selle tegelikust 50-kordsest sabast kuni selle sabas olevate arterite nägemiseni tegelikust suurusest 400-kordselt on teiste tüüpi mikroskoopidega võrreldamatu. Patoloogid uurivad ühendmikroskoobi all biopsiaid või nõelaga eemaldatud väikseid koetükke ja suurendavad ja suurendavad sageli oma parima hinnangu andmiseks. Kombineeritud valgusmikroskoop jääb seda tüüpi uuringute jaoks parimaks võimaluseks.
Fluorestsentsmikroskoopia eelised
Fluorestsentsmikroskoopia pakub vaatajale suuremat visuaalset detaili, kuna fluorestsentsvärvid võivad olla suunatud raku konkreetsetele struktuuridele. Rakuproovis olevad fluorestsentsmolekulid, mida nimetatakse fluorofoorideks, neelavad valgust ühel lainepikkusel ja eraldavad valgust erineva lainepikkusega. Fluorestsentsvärve saab kasutada koos spetsiifiliste valkude ja antikehadega, et esile tuua rakus olevad struktuurid ja isegi üksikud molekulid. Fluorestsentsmikroskoopia meetodid võimaldavad proovis kasutada mitut värvainet.
Valgusmikroskoopide puudus
Mikroskoopia tehnoloogia on viimastel aastakümnetel plahvatuslikult kasvanud ning mõned arenenumad mikroskoobid pakuvad täpsemat teavet kui klassikaline ühendmikroskoop. Fluorestsentsmikroskoobid võimaldavad teadlastel näha rakus samas kohas kahte erinevat valku, kasutades punaseid ja rohelisi markereid, mis kattuvad, moodustades kollase värvuse. Elektronmikroskoobid näitavad rakkude pinna kolmemõõtmelisi tunnuseid. Valgusmikroskoobi ühe puuduse nimetamiseks ei oma see fluorestsents- ega elektronmikroskoopia täiustatud võimalusi, kuna kasutab ainult valget valgust. Kuid elektronmikroskoopide ja fluorestsentsmikroskoopide hind ulatub kümnetest tuhandetest sadade tuhandete dollariteni, samal ajal kui liitmikroskoopi saab praegu osta vaid 100 dollari eest.