Sisu
Biokeemia uurib molekule nagu DNA, RNA ja valgud. Seda tüüpi molekulide eraldamiseks kasutavad teadlased blotimismeetodeid. Rakkudes esinevad nad seguna. Blotteerimine võimaldab teadlastel leida paljude seast ühe valgu, näiteks nõela heinakuhjas. Blotimine toimub tavaliselt lastes DNA, RNA või valgu segul voolata läbi geeliplaadi. See geel võimaldab väikestel molekulidel kiiremini liikuda kui suurematel. Eraldatud molekulid surutakse seejärel membraani külge, mis aitab molekulid geelilt membraanile viia. Molekulid kleepuvad membraani külge, kuid jäävad samasse kohta, üksteisest eraldi, justkui oleksid nad veel geelis.
Lääne blot
Western blot on üldine meetod valkude eraldamiseks suuruse järgi, kuid sirgetes kolonnides. Need paralleelsed veerud võimaldavad teadlastel võrrelda valkude kogust erinevates proovides, nagu näiteks keeglirajad, üksteise kõrval. Näiteks kui katsetaksite ravimi erinevate koguste mõju rakkude kasvule, raviksite nelja erinevat rakurühma erineva koguse ravimiga. Siis võiksid rakud lahti teha ja iga rühma valke geelil eraldi radadel käitada. Sellisel viisil valkude levitamine võimaldab teil näha, mida suurenev ravimite kontsentratsioon teatud valgule põhjustab.
Põhjapulk
RNA tuvastamiseks kasutatakse Northern-blotti. Rakud saab nende RNA vabastamiseks lahti murda. Erinevat tüüpi rakutüüpi RNA-d saab joosta geeli eraldi radadel. Geel jaotab erineva RNA suuruse järgi. Need kenad, paralleelsed RNA read võimaldavad teadlasel võrrelda, millist rakutüüpi on kui palju sellest RNA-st. See meetod võimaldab teadlasel kindlaks teha, kas teatud haiguse rakkudes on seda RNA-d rohkem või vähem. Northern blot võib paljastada, kuidas haigus RNA produktsiooni tasemel töötab.
Lõuna-Blot
Lõunapoolne blottimine on originaalne blotimismeetod, mis käivitas nimetamissüsteemi. Selle leiutas Edwin Southern. Southern-blotti kasutatakse DNA koguse tuvastamiseks segus. Sarnaselt valgu ja RNA-ga saab raku DNA vabastada ka siis, kui see rakk purustatakse. Lõuna-blotimine eraldab erinevat tüüpi rakutüüpi DNA suuruse järgi. Iga proovi DNA jaotatakse kenadesse, paralleelsetesse radadesse. Üksikuid DNA tükke saab tuvastada radioaktiivse või fluorestsentssondiga, mis on kavandatud seonduma ainult selle DNA tükiga. Radioaktiivse sondi energiasignaal või fluorestsentssignaalist tulenevad välgud annavad uurijatele teada, kui suur osa sellest DNA tükist on igas proovis.
Muud blotid
Kolme peamise blotimise tehnikat - lääne-, põhja- ja lõunaosa - on modifitseeritud erineval viisil, et tuvastada pisut erinevaid molekule. Näiteks Western blot vs Southern blot. tuvastab vastavalt valgu ja DNA. Iga modifitseeritud tehnikat tehakse tavaliselt tavapärasel viisil, kuid paralleelsetele radadele laotatava molekuli tuvastamiseks kasutatakse erinevat meetodit. Southwesterni blotid tuvastavad DNA külge kleepunud valgu molekulid. Loode blotid tuvastavad RNA külge kleepunud valgu molekulid. Farwesterni blotid tuvastavad teiste valkude külge kleepunud valgu molekulid.