Vööriplaadi eraldamise tehnikad

Posted on
Autor: Randy Alexander
Loomise Kuupäev: 2 Aprill 2021
Värskenduse Kuupäev: 27 Oktoober 2024
Anonim
Vööriplaadi eraldamise tehnikad - Teadus
Vööriplaadi eraldamise tehnikad - Teadus

Sisu

Ehkki neid ei saa palja silmaga näha, on baktereid igal pool. Neid leidub toidus, pinnases, vees, meie kodudes ja kehades ning nende pinnal. Bakterid esinevad üldiselt segapopulatsioonides. Konkreetse bakteri isoleerimine antud proovis teistest bakteriliikidest võimaldab mikrobioloogidel uurida selle struktuuri ja funktsiooni, selle tuvastamisel kasutatud omadusi. Mikrobioloogid isoleerivad baktereid sageli ühega mitmest vöötplaadi tehnikast.


Tööriistad

Mikroorganismide ülekandmiseks kasutatakse inokuleerimissilmust. See koosneb nikroom- või plaatinatraadist, mille ühes otsas on väike ümmargune silmus. Teine ots on sirge ja libiseb käepidemesse. Saadaval on ka plastist ühekordselt kasutatavad inokuleerimissilmused. Baktereid saab eraldada ainult siis, kui nad kasvavad. Mikrobioloogid kasvatavad baktereid vöötplaadi eraldamiseks madalas ümaras Petri tassis, mis on täidetud tahke söötmega, mida nimetatakse agariks. Agar jäljendab keskkonda, milles bakterid looduslikult kasvavad. Söötmega täidetud nõud on steriilsed ja kaantega, et vältida soovimatute organismide kasvu. Vööriplaadi eraldamise ajal steriliseeritakse inokuleerimissilmus korduvalt Bunseni põleti leegis.

Põhimõte

Vöötplaaditehnika on kõige populaarsem meetod spetsiifiliste bakterite eraldamiseks proovist, mis sisaldab mikroorganismide segu. See tehnika lahjendab organismide arvu ja vähendab nende tihedust. See võimaldab mikrobioloogidel eristada ja isoleerida üksikuid bakterikolooniaid. Koloonia on nähtav bakteriklaster. Kõik ühe koloonia bakterid pärinevad samast bakterirakust. Järelikult on üksikud kolooniad “puhtad” kolooniad. Puhas koloonia viiakse teisele plaadile, et saada puhas kultuur, mis koosneb ühte tüüpi bakteritest.


Protseduur

Kui see on õigesti tehtud, vooderdusplaadi eraldamine õhendab proovi ja võimaldab üksikutel bakterirakkudel areneda eraldatud kolooniateks. Mikrobioloog alustab inokuleeriva silmuse steriliseerimisega leegis. Ta jahutab silmuse, puudutades seda agarile, kastetakse silmus proovis ja levib edasi-tagasi, et katta plaadi osa. Ta steriliseerib silmuse, jahutab selle ja inokuleerib plaadi teise külgneva sektsiooni, lohistades silmuse mitu korda läbi esimese sektsiooni ja kattes teise sektsiooni siksakilise liigutusega. See korjab esimesest sektsioonist väikese arvu baktereid ja kannab need üle teise sektsiooni. Selle põhiprotseduuri korramiste arv sõltub kasutatud ribaplaadi meetodist. Vaatamata meetodile kasutatakse originaalset proovi ainult plaadi esimese sektsiooni inokuleerimiseks.

Streak Plate meetod

Vööriplaadi meetodid varieeruvad agarilõikude arvu järgi. T-vöötmeetodi puhul kasutatakse kolme sektsiooni: ülemine pool ja kaks võrdse suurusega alaosa. Esialgne inokulaat asetatakse plaadi ülemisse ossa. Bakterid lohistatakse ülemisest sektsioonist ühte alumisesse sektsiooni, seejärel sellest alumisest sektsioonist teise. Kvadrandimeetodi korral triibutatakse neli võrdses suuruses lõiku. Pidev vöötimismeetod hõlmab tavaliselt plaadi ülemise poole inokuleerimist, selle 180 kraadi pööramist ja plaadi teise poole inokuleerimist ilma silmust steriliseerimata või eelmisest sektsioonist baktereid lohistamata.