Kuidas arvutada rakkude kontsentratsiooni

Posted on
Autor: John Stephens
Loomise Kuupäev: 25 Jaanuar 2021
Värskenduse Kuupäev: 20 November 2024
Anonim
Lahuste protsendilise koostise arvutused
Videot: Lahuste protsendilise koostise arvutused

Teadlased ja tehnikud peavad sageli arvutama suspensiooni rakkude kontsentratsiooni. Näiteks kui patsient võtab verekabinetti arsti kabinetist, saab laboratoorium kasutada teatud meetodeid, et otsida vere valgeliblede kogust antud veremahust. See annab arstile palju teavet oma patsiendi tervise, eriti tema immuunsussüsteemi ja selle kohta, kas ta võitleb infektsiooni või mõne muu haigusega. Sellised testid võivad otsida paljudest muudest vererakkudest, samuti seljaajuvedelikest ja muudest kehavedelikest, näiteks spermarakkude arv spermas viljakuse tagamiseks. Teadlased arvutavad ka bakterite, pärmide ja muude mikroorganismide rakukontsentratsiooni paljudel eesmärkidel, alates ökoloogilistest uuringutest kuni tööstuslike tehnoloogiateni. Üht levinumat tehnikat õpetatakse ka paljudes kolledži bioloogia tundides ja selleks kasutatakse seadet, mida nimetatakse loenduskambriks.


    Enne kui rakususpensioon pääseb loendamiskambrisse, võib see vajada lahjendamist, kuna see võib sisaldada tuhandeid või miljoneid rakke. Sel juhul ei saa rakke mõistlikult arvestada. Proovi lahjendamiseks asetage steriilse pipeti abil kümme mikroliitrit rakulahust katseklaasi, mis sisaldab 90 mikroliitrit lahjendit. Lahjendi tüüp sõltub lahtri tüübist. Segage see hästi. See lahus on nüüd kümme korda lahjendatud rohkem kui esialgne proov, seega on selle lahjendustegur 10-1. Märgista see. Korrake seda mitu korda, kasutades iga kord steriilset pipeti, kuni lahus on piisavalt lahjendatud. Kui lahjendasite seda teist korda, lahjendati teine ​​katseklaas 100 korda rohkem kui algne lahus, nii et lahjendustegur oli 10-2 ja nii edasi.

    Võimalik, et peate loenduskambri õige lahjendusteguri määramiseks proovima mitut lahjendust. Loenduskamber on põhimõtteliselt väga väike, selge, ristkülikukujuline kast, millel on täpne sügavus ja täpne võre, mis on ülaosale kirjutatud. Seda tuntakse ka kui hemotsütomeetrit või mõnikord ka hematsütomeetrit. Eesmärk on, et suspensioon oleks piisavalt lahjendatud, et kui seda loendamise kambris vaadata, ei kattuks ükski rakk ja need jaotuksid kogu ruudustikus ühtlaselt. Lahjendatud rakke sisaldav suspensioon pipeteeritakse loenduskambri süvendisse, kus see satub kapillaaride toimel võrekambrisse. Asetage loenduskamber mikroskoobi lavale ja vaadake seda väikese võimsusega.


    Võre sisaldab ruute, mis on tehtud veelgi väiksematest ruutudest. Valige valitud mustri järgi umbes neli või viis ruutu või kui palju peate loendama vähemalt 100 lahtrit, näiteks neli nurka ja keskmist ruutu. Kui lahtrid on suured, võivad need olla suured ruudud, kuid kui lahtrid on väikesed, võite valida selle asemel väiksemad ruudud.

    Iga ruudustiku ruumala erimaht võib loenduskambri tootja järgi erineda, kuid sageli on kambri sügavus 0,1 millimeetrit, suurte ruutude pindala on 1 ruut millimeeter ja väiksemate ruutude pindala on 0,04 ruut millimeetrit. Suuremate ruutude maht on siis 0,1 kuupmeetrit millimeetrit. Selle näite korral eeldage, et loendasite kokku viite ruutu kokku 103 rakku ja lahjendasite esialgset proovi, kuni lahjendustegur oli 10-2.

    Kui iga ruudukujulise ruudu ruumala on 0,1 kuupmillimeetrit ja loendati viis, siis loendatud kambri kogumaht oli 0,5 kuupmillimeetrit ja ruume oli 103. Kahekordseks, et muuta see 1 kuupmillimeetriseks, oleks see 206 rakku. Üks kuupsentimeeter vastab 1 milliliitrile, mis on kasulik mõõt vedelike jaoks. Kuupsentimeetris on 1000 kuupmillimeetrit. Seega, kui suspensiooni oleks olnud kuupsentimeeter või milliliiter, oleksite loendanud 206 000 (206 x 1000) rakku. See näeb välja võrrandina:


    Ruutvõrgu ruutmaht × loendatud ruutude arv = loendatud suspensiooni kogumaht

    Rakkude arv ÷ loendatud suspensiooni maht = rakkude arv kuupmeetri millimeetri kohta

    Rakkude arv millimeetri kohta kuupmeetri × 1000 = rakkude arv milliliitri kohta

    Peate arvestama kõigi lahjendustega, mis on tehtud selleks, et esialgne lahus oleks mikroskoobi all loetav. Selles näites on lahjendustegur 10-2. Lahuse algkontsentratsiooni arvutamiseks:

    Rakkude arv milliliitri lahjendusteguri kohta = Rakkude kontsentratsioon

    Selle näite korral on rakkude arv milliliitris 206 000 ja jagades selle 10-ga-2 (0,01) annab algses proovis rakkude kontsentratsioon 20 600 000 rakku milliliitri kohta.