Sisu
- Mis on rakud?
- Miks loendada rakkude tihedust?
- Mikroskoopide tüübid
- Rakkude loendamise meetodid
- Mikroskoobi loenduskoja ettevalmistamine
Rakud on väikseimad ja lihtsamad struktuurid, mis avaldavad kõiki tunnuseid, millega teadlased nõustuvad, et tähendavad "elu". Need omadused hõlmavad üksnes füüsikalise struktuuri, paljunemisvõimaluse, täpselt määratletud metaboolsete radade komplekti jne. Rakkude avastamine 17. sajandi lõpus tänu varajasetele mikroskoopidele ning hilisematele tehnoloogia ja mikrobioloogia edusammudele on võimaldanud rakke põhjalikult uurida nii üksikult kui ka rühmadena.
Teaduse üliõpilasena võite leida olukorra, kus peate ühel või teisel põhjusel loendama rakke mikroskoobi all. Need võivad olla punased verelibled, bakterirakud või mõni muu rakk või (tavaliselt) rakutüüpide segu. Kas oskate mõelda mis tahes põhjusel, et tervishoiutöötajatel võib olla oluline teada sellist teavet võtmeaegadel?
Mis on rakud?
Rakud sisaldavad vähemalt nelja elementi: DNA (desoksüribonukleiinhape), mis toimib lähteorganismide geneetilise materjalina; raku membraan välispiirina; tsütoplasma, vesine geel, mis täidab suurema osa sisemusest; ja ribosoomid valkude tootmiseks. Mõnel rakul on sellest pisut rohkem ja paljud organismid on valmistatud ainult ühest rakust; valdav enamus neist üherakulistest organismidest on prokarüootid.
Tipptasemel klassifitseerimise domeen Prokarüota hõlmab baktereid ja organismide kogumit, mida kunagi nimetatakse arhebakteriteks (Archaea). Paljudel neist rakkudest on seinad ja kolooniad, mis teeb neist hõlpsasti eristatava eukarüootne rakud mikroskoopil. Eukaryota (loomadel, taimedel ja seentel) on rakke, millel on organellid, sisemiste membraanidega seotud struktuurid nagu mitokondrid ja kloroplastid.
Miks loendada rakkude tihedust?
Mitmes keskkonnas on oluline teada, kas mingid mikroorganismid esinevad ja kui, siis millise tihedusega. See võimaldab mikrobioloogidel mitte ainult teada, kas antud haigust põhjustav mikroobrakk sisaldub mikroskoobi all uuritavas proovis, vaid ka seda, kui palju neid on ja kas nende arv suureneb või väheneb.
See võib olla eriti oluline rahvatervise valdkonnas, kus ametliku poliitikaga määratletakse, mil määral peavad põllumajandussektorite (nt piimatooted ja veiseliha) pakkujad pakkuma madala bakterisisaldusega tooteid.
Mikroskoopide tüübid
Kõige tavalisem mikroskoop, mida laboritingimustes kohanud on ühendmikroskoop. See on kerge mikroskoop, millel on kaks "virnastatud" suurendusklaasi, mis pakub suurt suurendust, kuid madalat eraldusvõimet. Seetõttu on hea vaadata üksikuid rakke, kuid mitte rakurühmi. A lahkamine või stereoskoopiline mikroskoop pakub vastupidist: väike suurendus, kuid kõrge eraldusvõime.
Kumbki neist võiks olla sobiv loenduskatseks või treeninguks, sõltuvalt vaadeldavate rakkude slaidist ja vajalikust suurendustasemest, et saada mikroskoobi läätse (de) all kasulikku nägemisvälja.
Rakkude loendamise meetodid
Mis tahes rakkude loendamise arvutused mikroorganismide rakkude loendamise piirkonnas hõlmavad antud proovis väga väikeseid lahjendusi ja väga suurt hulka organisme. Võite eeldada, et näete ja kasutate teaduslikke märkeid (see tähendab eksponente) oma lugemisel ja asjakohaste arvutuste tegemisel.
Seda tüüpi rakkude loendamise tavalised meetodid on a plaatide arv, mis kasutab bakteriaalsetest rakkudest tekkivate kolooniate kasvu proovis, et hinnata elujõuliste organismide arvu nägemisväljas; a otsene rakkude arv, mis nõuab erinevaid geomeetrilisi ja algebralisi arvutusi; ja hägusus, mis kasutab proovi valguse läbitungimatust bakterite kasvu hinnanguna selles proovis.
Mikroskoobi loenduskoja ettevalmistamine
Võib juhtuda, et olete kohanud automaatset lahtriloendurit, mida nimetatakse a hemotsütomeeter (seda nimetati seetõttu, et see oli algselt mõeldud ainult vereproovide jaoks). Need muudavad rakkude loendamise töö mikroskoobi abil palju lihtsamaks, kuid nagu alati, tuleb enne iga kasutamist masina sisemisi osi puhastada, et tagada ülitäpsus.