Sisu
HPLC pakub kiiret, automatiseeritud ja väga täpset meetodit proovis olevate teatud keemiliste komponentide tuvastamiseks, kuid see võib olla kulukas, keeruline ja ei tööta kõigi proovide jaoks. Meditsiini-, kohtuekspertiisi-, keskkonna- ja tootmislaborid kasutavad seda meetodit proovides sisalduvate kemikaalide kvantifitseerimiseks ja eraldamiseks. HPLC-l on teiste tehnikatega võrreldes nii eeliseid kui ka puudusi.
HPLC ja sarnased tehnikad
Nagu teisedki kromatograafiavormid, võimaldab HPLC eraldada keemilisi koostisosi liikuva ja statsionaarse faasi abil. Liikuv faas on vedel ja statsionaarne faas on tahke. Kuna erinevad komponendid liiguvad erineva kiirusega, eralduvad nad üksteisest. Alternatiivsed tehnikad hõlmavad kapillaarelektroforeesi, kus ained migreeruvad läbi elektrivälja lahuste, ja muid kromatograafilisi meetodeid, näiteks tahke faasi ekstraheerimine, gaasikromatograafia ja õhukese kihi kromatograafia.
Kiirus, tõhusus ja täpsus
Võrreldes teiste kromatograafiatehnikatega, näiteks TLC, on HPLC äärmiselt kiire ja tõhus. Vedela lahusti surumiseks läbi tahke adsorbeeriva materjali kasutatakse pumba, mitte gravitatsiooni abil, erineva kiirusega liikudes eralduvad erinevad keemilised komponendid. Protsessi saab lõpule viia umbes 10–30 minutiga ja see tagab kõrge eraldusvõime. See on täpne ja väga reprodutseeritav. Kuna see on suuresti automatiseeritud, saab põhilisi HPLC uuringuid läbi viia minimaalse väljaõppega.
Kulud ja keerukus
Vaatamata oma eelistele võib HPLC olla kulukas, nõudes suures koguses kalleid orgaanilisi aineid. Sellised tehnikad nagu tahke faasi ekstraheerimine ja kapillaarelektroforees võivad olla odavamad ja isegi kiiremad, eriti heade tootmistavade kohaselt läbiviidavate analüüside jaoks. Ehkki olemasolevaid HPLC-meetodeid on suhteliselt lihtne kasutada, võib see probleemide tõrkeotsinguks või uute meetodite väljatöötamiseks olla keeruline. See on suuresti tingitud erinevate moodulite, veergude ja mobiilsete faaside hulgast.
Tundlikkus ja eraldusvõime
Üldiselt on HPLC keemiliste komponentide tuvastamisel ja kvantifitseerimisel mitmekülgne ja äärmiselt täpne. Paljude sammudega on HPLC täpsus suures osas automatiseeritud ja seetõttu väga reprodutseeritav. HPLC-l on teatud ühendite suhtes madal tundlikkus ja mõnda pole võimalik tuvastada, kuna need on pöördumatult adsorbeerunud. Lenduvaid aineid saab paremini eraldada gaasikromatograafia abil.