Nagu mis tahes teadusliku instrumendi kasutamisel, peate enne proovi analüüsimist veenduma, et seade on heas töökorras. Mõõtevahendi reageerimise kontrollimisel teadaoleva prooviga kontrollitakse, kas instrument on korralikult kalibreeritud. Spektrofotomeetrid vajavad seadme õige reageerimise tagamiseks perioodilist kalibreerimist. Infrapuna (IR) spektrofotomeetrites kasutatakse kalibreerimisstandardina polüstüreeni. Instrumendi skannimisel polüstüreeni tükiga proovihoidjas kontrollitakse IR-spektril nähtud piikide esinemist ja piikide suhtelist intensiivsust.
Lülitage spektrofotomeeter sisse ja laske sellel soojeneda vähemalt 10 minutit. Allika stabiliseerumiseks on vaja soojenemisaega. Stabiilse allikata ei saa loota saadud spektritele. Analüütiline signaal põhineb allika kiirguse summutamisel proovi poolt.
Kalibreerimisstandardi täitmiseks pange proovihoidikusse tükk polüstüreenkile. Ilma katsetamata teadaolevate spektritega proovi, mida nimetatakse standardiks, pole teil kindlust, et spektrofotomeeter töötab õigesti.
Hankige polüstüreenproovi spektrid. Võrrelge spektrit IR-spektri standardväärtuse spektriga. Veenduge, et kõik oodatavad piigid esineksid katsespektrites. Piikide asukoht peab vastama neeldumise lainepikkusele.
Kontrollige spektrit, veendumaks, et signaali tugevus jääb tugevaima piigi maksimaalse väärtuse vahemikku 95 protsenti. Kui spektri tugevaim tipp on enam-vähem täisskaala kohal, reguleerige summutust, et signaal oleks õige.
Kalibreerige IR-spektrofotomeeter sageli. Minimaalne kalibreerimissagedus peaks hõlmama skannimist vahetult enne ja pärast vahetult teie päeva töö tegemist.